BC-CL01 |
BC Trans-DNA plus轉染試劑 |
規(guī)格 | 1mL/1.5mL |
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【貨號】 BC-CL01
【規(guī)格】 1ml/1.5ml
【保存】 ?2-8℃,12個月
【類型】 ?陽離子聚合物
【產品介紹】
BC Trans-DNA plus是一款專為難以轉染的細胞設計的DNA轉染試劑,它能夠高效地傳送質粒DNA。相較于其他轉染試劑,BC Trans-DNA plus擁有卓越的DNA轉染能力,其優(yōu)勢在于高轉染效率、血清干擾小、低毒性、良好穩(wěn)定性、操作簡便以及出色的可重復性。
【應用范圍】
BC Trans-DNA plus轉染試劑表現出廣泛的適用性,能夠高效應對多種難轉染細胞株的DNA轉染需求,無論是瞬時轉染還是穩(wěn)定轉染。特別值得一提的是,該試劑在多種貼壁細胞系中表現出色,尤其對于BMDC、4T1、CT26、DC2.4等難以轉染的細胞類型,依然能夠實現高轉染效率,并且具備良好的重復性。
【質粒DNA轉染步驟】
請確保所有操作都在無菌條件下進行,并遵循實驗室的安全規(guī)范。
以24孔板為例,請參考表1的轉染規(guī)模調整,步驟如下:
1. 細胞接種:在細胞培養(yǎng)板中,每孔接種0.5~1.0×105個細胞。將細胞在適宜條件下培養(yǎng)12~24小時,以確保在轉染時細胞密度達到約60~70%的融合度。
2. DNA稀釋:將所需的質粒DNA用Opti-MEM培養(yǎng)基稀釋,使其終濃度達到0.1mg/mL。
3. 復合物制備:
(1)取1μL的BC Trans-DNA plus試劑原液,加入9μL的Opti-MEM培養(yǎng)基中。
(2)同時,取4μL濃度為0.1mg/mL的質粒DNA,加入6μL的Opti-MEM培養(yǎng)基中。
(3)將上述兩者等體積混合,以形成轉染復合物。
(4)室溫靜置:讓轉染復合物在室溫下靜置10分鐘,以確保其充分結合。
4. 轉染細胞:將20μL的轉染復合物均勻加入到細胞培養(yǎng)板的每個孔中,并輕輕混勻。
5. 培養(yǎng)與檢測:將細胞在37℃下繼續(xù)培養(yǎng)18~48小時。在此期間,無需更換培養(yǎng)基。
【質粒DNA的轉染優(yōu)化】
可通過改變細胞密度、 DNA濃度以及BC Trans-DNA plus濃度對轉染進行優(yōu)化。保證細胞融合度在60%以上,BC Trans-DNA plus (μL):DNA (μg)可以在2:1和5:1之間調整。
表1. ?不同培養(yǎng)板所需轉染試劑和DNA的用量
培養(yǎng)板
接種
培養(yǎng)基
Opti-MEM稀
釋后終體積
DNA轉染
試劑用量
DNA
96孔板
0.3cm2
200μL
10μL
0.5μL
0.2μg
24孔板
2.0cm2
500μL
20μL
1μL
0.4μg
12孔板
4.0cm2
1mL
40μL
2.5μL
1μg
6孔板
10.0cm2
2mL
100μL
5μL
2μg
60mm
20.0cm2
5mL
0.2mL
10μL
4.0μg
10cm
60.0cm2
15mL
0.6mL
30μL
12μg